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冰冻切片包埋剂制备注意事项分享
来源于:上海欧冠体育【中国】有限公司官网科技有限公司,浙江欧冠体育【中国】有限公司官网科技有限公司 | 发布时间:2024/6/28 17:11:00

操作步骤
1、冰冻制片组织常规取材。
2、取材后的组织材块用干擦布或吸水纸充分吸干表面水分。
3、在冷冻切片机里预冷的组织托上滴加冷冻切片组织包埋剂。
4、待包埋剂底部变白后放上组织材块。
5、迅速放上冷冻锤(低于-25℃),待组织与包埋剂冷冻凝固后取下冷冻锤。
6、将组织托夹入切片夹头,进行切片。
7、切片完成后可将组织托置于室温下 3-5 分钟解冻后变软,用水将包埋剂冲洗干净。
8、将组织放入包埋盒,浸入中性缓冲福尔马林固定液中进行组织固定。

结果
1、包埋效果良好:包埋剂均匀围绕组织,冷冻后包埋剂和组织变白,硬度适宜,切片平整。
2、包埋效果不良:包埋剂过多导致溢出组织托外围、包埋剂过少不能有效支撑组织或冷冻锤温度不够低导致冷冻速度过慢引起组织偏软,不能切片。

注意
1、冷冻切片组织包埋剂到达最佳切片硬度所要求的温度区间为-10℃ - -30℃,温度过高质软不能切片,温度过低切片会出现碎裂现象。
2、组织脱水前需要将组织表面残留的冷冻切片组织包埋剂充分洗净,避免包埋剂进入脱水流程。
3、冷冻切片贴片固定后不水洗就进入苏木素染色流程,切片中残留包埋剂将会与苏木素染色液结合,出现非特异性苏木素染色。

*以上内容来自网络

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