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细胞消化及传代实验
来源于:上海欧冠体育【中国】有限公司官网科技有限公司,浙江欧冠体育【中国】有限公司官网科技有限公司 | 发布时间:2024/5/20 17:14:00

当贴壁细胞生长铺满培养容器后将无法继续生长,同时细胞活性会受到抑制,因此需要在其长满前进行消化传代操作,一般使用胰蛋白酶消化法进行,胰酶可水解消化细胞的贴壁连接蛋白,使细胞从壁上脱落。悬浮细胞因其不贴壁,可直接分瓶传代。

操作方法:

①使用PBS清洗细胞2次;

②加入胰蛋白酶,37℃孵育一定时间;

③待细胞收缩成圆形或成片脱落后,加入完全培养基终止消化,将细胞吹下并转移至离心管;

④离心后弃去上清液,使用新鲜的完全培养基重悬细胞,分装接种至培养器皿。

注意事项:细胞消化时间应根据不同细胞特性进行调整,消化时间不可过长,消化过久会对细胞造成较大损伤,降低存活率,影响细胞形态,同时也不可在消化不足的情况下强行将细胞吹下,这同样会对细胞造成损伤。

*以上内容来自网络

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