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琼脂糖的实验过程
来源于:上海欧冠体育【中国】有限公司官网科技有限公司,浙江欧冠体育【中国】有限公司官网科技有限公司 | 发布时间:2024/3/14 17:10:00

材料、试剂及器具

1、材料
合适的Marker(分子量标准);DNA 样品
2、试剂
加样缓冲液(6x或10x);琼脂糖;溴化乙锭(EB)。
3、器具
(1)电泳系统:电泳仪、水平电泳槽、制胶板等。
(2)凝胶成像系统或紫外透射仪。

实验过程

1、按所分离的 DNA 分子的大小范围,选择合适的比例的凝胶,称取适量的琼脂粉,放到一锥形瓶中,加入适量的 TBE电泳缓冲液。然后置微波炉加热至琼脂粉完全溶化,溶液透明。稍摇匀,得胶液。待胶液却至 60℃左右,在胶液内加入适量的比例的溴化乙锭液。
2、水平放置胶槽,在一端插好梳子,在槽内缓慢倒入已况至 60℃左右的胶液,使之形成均匀水平的胶面。
3、待胶凝固后,小心拔起梳子,使加样孔端置阴极段放进电泳槽内。
4、在槽内加入TBE电泳缓冲液,至液面覆盖过胶面。
5、把待检样品,按合适比例与加样缓冲液混匀,用移液枪加至凝胶的加样孔中。
6、接通电泳仪和电泳槽,并接通电源,调节合适电压,稳压输出,开始电泳。
7、观察溴酚兰的带(蓝色)的位置。当其移动至约凝胶长2/3处时,可停止电泳。
8、在紫外透视仪的样品台上重新铺上一张保鲜膜,赶去气泡平铺,然后把凝胶放在上面。关上样品室外门,打开紫外灯(360nm 或 254nm),通过观察孔进行观察。

 

*以上内容来自网络

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